Biologie Question #3735
Helen (Genre: femelle, Àge: 15 années) de Toronto sur 8 décembre 2006 demande:
Comment pouvez-vous extraire les bactériocines (colicins) à partir d'E. Coli ? Je voudrais examiner l'efficacité des bactériocines en détruisant ses propres espèces. Ainsi je projette à d'abord extrais les bactériocines et puis les mets parmi les bactéries cultivées pour voir si la croissance de ces bactéries est encore présente. Le problème que j'ai est comment extraire les bactériocines. Au cas où j'employer la centrifugation ? Est-ce que si oui, à quelle vitesse, longueur de temps, et à la façon dont je peux l'extraire après ?
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La réponse
Bonjour Helen,
Je sais de l'étudiant projette que les colicins ont la valeur potentielle dans le biocontrol, mais ce n'est pas mon meilleur champ d'étude. Quand je me cours dans un tel sujet regarder dans deux endroits principaux pour information : Premier Google ! Quand le google « colicins » d'I et passent en revue alors les coups, un tient dehors qui devraient vous aider beaucoup - http://www.ucs.mun.ca/~cjackman/Prokaryotes.html
En second lieu - disciple de Google - sur le menu de google, choisir puis le disciple choisi. Ceci vous portera à la plus grande base de données des articles concernant la recherche sur des colicins. Les artlicles que vous trouvez là auront besoin de l'aide d'un étudiant d'université, de l'étudiant gradué ou même d'un professeur pour vous dépanner car elle expliquera l'expérience que d'autres groupes ont employée. J'ai trouvé beaucoup d'enfants de lycée capables figurer dehors beaucoup de choses avec un bon professeur, aussi. Vous pourriez commencer par un article de reveiw comme grande aide.
Maintenant, quelques idées pour de vraies expériences. Il s'avérerait que le type de protéine de colicin produit par une contrainte ne va pas être fait jusqu'à ce que les bactéries soit sous l'effort - alors il non seulement sera fait, mais également exporté en dehors des bactéries. Cela suggère qu'elles soient pas présent probable en quantité élevée. Alors elle serait trouvée dans les médias partis des bactéries. Prouver vraiment que tout effet que vous voyez sur vos bactéries d'essai est vraiment dû aux colicins, vous devrait les épurer. Et cela mène aux maux de tête vraiment grands.
Du premier emplacement que j'ai trouvé, il semble que les gènes de colocin sont sur des plasmides, pas habituellement dans le génome d'E.coli. Cela signifie que vous devriez pouvoir trouver le joli facile de plasmides des contraintes « normales » ou cliniques d'E.coli. Bien, ce moyens que vous devez avoir les contraintes - pourrait prendre un moment. Bien, ce qui si vous pouvez trouver quelques plasmides que d'autres ont déjà trouvés et stocké loin. Alors vous devriez trouver le gène, copier le chemin de gène de l'E.coli indigène et l'entrer dans le laboratoire E.coli. Quand nous faisons ceci, nous assurons la commande de tourner le gène marche-arrêt, ainsi nous pouvons faire la protéine lorsque nous voulons. Elle peut être mortelle au laboratoire E.coli cependant ! Une fois qu'un gène est copié, et vous pouvez faire la protéine, vous devez alors l'épurer, mais il est habituellement beaucoup plus facile de faire parce que nous pouvons marquer la protéine copiée.
Toujours, ceci semble comme beaucoup de travail pour TOI ! Que diriez-vous de la manière facile de vous obtenir allant - pourquoi pas vous achat juste certains.
si vous allez à la compagnie chimique de Sigma-Aldrich, et au colicin de recherche, vous trouverez
C3026 sigma Colicin E1 d'Escherichia coli
poudre lyophilisée, protéine de 10.000-20.000 units/mg
Préparé par une modification de la méthode de Schwartz, S. et Helinski, D., journal de chimie de Biololgical., 246, 6318 (1971).
Une unité par ml est la concentration minimale exigée pour causer une zone de se dégager sur une pelouse des cellules d'E. coli ATCC9637.
La dernière information est alors un peu au sujet d'un E.coli susceptible, mais pas celui qui l'ont produit. J'ai parié que la référence du journal de la biochimie t'indiquera cela. Puis vous le besoin juste de trouver ces deux contraintes d'E.coli. CE sera BEAUCOUP plus facile.
Bonne chance !
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